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技術(shù)文章 / article
人結(jié)腸癌細(xì)胞株的細(xì)胞形態(tài)是不太規(guī)則的三角形
原載自：[技術(shù)資料頻道] 2016-12-05 瀏覽次數(shù)：1617
人結(jié)腸癌細(xì)胞株是一種成團(tuán)、貼壁生長的細(xì)胞,如果狀態(tài)好的情況下,生長非?？?，細(xì)胞形態(tài)是不太規(guī)則的三角形.在低濃度時，此細(xì)胞長梭型（不好描述），高濃度時長成一張地毯，后者才是狀態(tài)的。.
收到人結(jié)腸癌細(xì)胞株atcc后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。
?。ㄒ唬┤绻?xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。
因時間及溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問題（如：比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落）。人結(jié)腸癌細(xì)胞株在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，必須恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)。
