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技術(shù)文章 / article
細胞株培養(yǎng)傳代時的指數(shù)增生期解讀
原載自:[技術(shù)資料頻道] 2021-01-15 瀏覽次數(shù):1407
細胞株的培養(yǎng)所謂細胞“一代”系僅指從細胞接種到分離再培養(yǎng)時的一段時間,這已成為培養(yǎng)工作中的一種習慣說法,它與細胞倍增一代非同一含義。如某一細胞系為第153代細胞,即指該細胞系已傳代153次。它與細胞世代或倍增不同。在細胞一代中,細胞能倍增3-6次。
細胞株培養(yǎng)時指數(shù)增生期是細胞增值旺盛的階段,細胞分裂相增多。指數(shù)增生期細胞分裂相數(shù)量可作為判定細胞生長旺盛與否的一個重要標志。一般以細胞分裂表示,即細胞群中每1000個細胞中的分裂相數(shù)。體外培養(yǎng)細胞分裂指數(shù)受細胞種類、培養(yǎng)液成分、pH、培養(yǎng)箱溫度等多種因素的影響。一般細胞的分裂指數(shù)介于0.1%-0.5%,初代細胞分裂指數(shù)低,連續(xù)細胞和腫瘤細胞分裂指數(shù)可高達3%-5%。pH和培養(yǎng)液血清含量變動對細胞分裂指數(shù)有很大影響。指數(shù)增生期是細胞一代中活力好的時期,因此是進行各種實驗好的和主要的階段。
在接種細胞數(shù)量適宜情況下,指數(shù)增生期持續(xù)3-5天后,隨細胞數(shù)量不斷增多、生長空間漸趨減少、后細胞相互接觸匯合成片。細胞相互接觸后,如培養(yǎng)的是正常細胞,由于細胞的相互接觸能抑制細胞的運動,這種現(xiàn)象稱接觸抑制。而惡性細胞則無接觸抑制現(xiàn)象,因此接觸抑制可作為區(qū)別正常與癌細胞標志之一。腫瘤細胞由于無接觸抑制能繼續(xù)移動和增殖,導致細胞向三維空間擴展,使細胞發(fā)生堆積。細胞接觸匯合成片后,雖發(fā)生接觸抑制,只要營養(yǎng)充分,細胞仍然能夠進行增殖分裂,因此細胞數(shù)量仍在增多。但當細胞密度進一步增大,培養(yǎng)液中營養(yǎng)成分減少,代謝產(chǎn)物增多時,細胞因營養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響,則發(fā)生密度抑制,導致細胞分裂停止。因此細胞接觸抑制和密度抑制是兩個不同的概念,不應混淆。