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技術(shù)文章 / article
特定細(xì)胞株的培養(yǎng)條件怎么獲取到呢?
原載自:[技術(shù)資料頻道] 2021-12-04 瀏覽次數(shù):1083
細(xì)胞株的培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無(wú)菌、適宜溫度、酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件等),使之生存、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。如何查詢(xún)一個(gè)特定細(xì)胞株的培養(yǎng)條件呢?
ATCC收集了絕大多數(shù)細(xì)胞的詳細(xì)資料。打開(kāi)ATCC網(wǎng)頁(yè)的Cells and hybridomas鏈接,輸入細(xì)胞名稱(chēng)就可以搜索ATCC的細(xì)胞數(shù)據(jù)庫(kù)。數(shù)據(jù)庫(kù)中有每一種細(xì)胞的詳細(xì)描述,包括細(xì)胞的來(lái)源,培養(yǎng)和凍存條件及相關(guān)資料。
培養(yǎng)細(xì)胞株沒(méi)有固定的培養(yǎng)條件,新的細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)要詳查資料。建議將新配制的培養(yǎng)基放置于4℃,避光保存盡量在一周內(nèi)使用完畢,培養(yǎng)基越新鮮越好。一旦在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí),應(yīng)該在1-2周內(nèi)使用它。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_(kāi)始降解。
細(xì)胞株的培養(yǎng)基中是否添加抗生素?
除了特殊篩選系統(tǒng)外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。為防止細(xì)菌、真菌污染,可以加入青霉素-鏈霉素雙抗溶液,其培養(yǎng)基中的終濃度為青霉素100U/ml,鏈霉素為100ug/ml,但是不建議長(zhǎng)期使用。
培養(yǎng)液pH如何影響細(xì)胞生長(zhǎng)?
由于大多數(shù)細(xì)胞適宜PH值為7.2-7.4,偏離此范圍對(duì)細(xì)胞將產(chǎn)生有害的影響。各種細(xì)胞對(duì)PH值要求也不*相同,原代細(xì)胞培養(yǎng)一般對(duì)PH值變動(dòng)耐受差,無(wú)限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。
總體來(lái)說(shuō),細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些,偏酸環(huán)境中更有利于細(xì)胞的生長(zhǎng)。因此,配制培養(yǎng)用液時(shí)可把液體的PH值稍微調(diào)的偏酸一些。液體在經(jīng)過(guò)0.1um或0.2um濾膜過(guò)濾時(shí),PH值會(huì)向上浮動(dòng)0.2左右。