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新聞動態(tài) / news
關于ATCC細胞系與細胞株的概念區(qū)分
原載自:[行情動態(tài)] 2018-11-13 瀏覽次數(shù):1836
關于ATCC細胞系與細胞株的概念區(qū)分,很多客戶不是很了解,今天就簡單介紹一下。
細胞株的概念
通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養(yǎng)物稱為細胞株,也就是說,細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。
ATCC細胞系的概念
細胞系是原代細胞經(jīng)傳代成功后即為細胞系。泛指一般可能傳代的細胞。其中能夠連續(xù)傳代的細胞叫做連續(xù)細胞系或無限細胞系,不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細胞系。大多數(shù)二倍體細胞為有限細胞系。由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限,可稱為有限細胞系,如可以連續(xù)培養(yǎng),則稱為連續(xù)細胞系,培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。人類腫瘤細胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
ATCC細胞系的細胞培養(yǎng)步驟:
細胞培養(yǎng)步驟一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備培養(yǎng)基;北美胎牛血清,10%;雙抗1%。
2) 培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. CHL-1細胞ATCC菌種處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
ATCC細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。 也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。(由此便引申出了后來的有限細胞系(FiniteCellLine)、無限細胞系(InfiniteCellLine)),因此,細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞(特定環(huán)境下口語和書面語都使用),廣義是指可傳代的細胞。
細胞株的概念
通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養(yǎng)物稱為細胞株,也就是說,細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。
ATCC細胞系的概念
細胞系是原代細胞經(jīng)傳代成功后即為細胞系。泛指一般可能傳代的細胞。其中能夠連續(xù)傳代的細胞叫做連續(xù)細胞系或無限細胞系,不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細胞系。大多數(shù)二倍體細胞為有限細胞系。由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限,可稱為有限細胞系,如可以連續(xù)培養(yǎng),則稱為連續(xù)細胞系,培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。人類腫瘤細胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
ATCC細胞系的細胞培養(yǎng)步驟:
細胞培養(yǎng)步驟一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備培養(yǎng)基;北美胎牛血清,10%;雙抗1%。
2) 培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. CHL-1細胞ATCC菌種處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
ATCC細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。 也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。(由此便引申出了后來的有限細胞系(FiniteCellLine)、無限細胞系(InfiniteCellLine)),因此,細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞(特定環(huán)境下口語和書面語都使用),廣義是指可傳代的細胞。
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