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藥靶細(xì)胞株 > GPCR細(xì)胞株 > CBP71497CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293

CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293
名稱 CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293
型號(hào) CBP71497
報(bào)價(jià)
特點(diǎn) CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293
  • 詳細(xì)內(nèi)容

CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293

I. Background
    降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)家族包括 CGRP 本身、降鈣素(CT)、腎上腺髓質(zhì)素 (AM)和胰島淀粉樣肽(AMY)。 胰淀素(Amylin)受體的三種類型的已被確定,即 AMY1,AMY2 和 AMY3。胰淀素 受體屬于 B 類 GPCR,是異二聚體復(fù)合物,由降鈣素受體(CTR)與受體活性修飾蛋白 (RAMPs)結(jié)合形成。該受體的 CTR 組分具有相同的 GPCR 結(jié)構(gòu):7 個(gè)跨膜相互連接的α- 螺旋,將細(xì)胞外信號(hào)傳遞到細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞質(zhì)信號(hào)級(jí)聯(lián)。RAMP 有三種類型(RAMP1、 RAMP2 和 RAMP3),它們共享 31%的氨基酸序列,具有相似的基本結(jié)構(gòu)。RAMP 是將 CTR 轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞膜并調(diào)節(jié)其配體特異性的重要肽,它可以改變特定 GPCR 的藥理學(xué)、功能 和細(xì)胞運(yùn)輸。 哺乳動(dòng)物細(xì)胞中 Amylin 受體的激活已被證明可以提高 cAMP,并被認(rèn)為與 Gs 蛋白和 腺苷酸環(huán)化酶的刺激有關(guān)。在 RAMPs 的存在下,其與胰淀素的結(jié)合親和力可以被修飾。 CTR 和 RAMP1 或 CTR 和 RAMP3 的異質(zhì)結(jié)構(gòu)被認(rèn)為有利于與胰淀素結(jié)合,介導(dǎo)大腦中的 生理功能。AMY3 的激活刺激 G 蛋白 Gαs,進(jìn)一步控制腺苷酸環(huán)化酶(AC),隨后增加細(xì) 胞 cAMP。cAMP 與 PKA 調(diào)控亞基(R2)的結(jié)合誘導(dǎo) PKA 四聚體全酶解離,導(dǎo)致 PKA 催 化亞基的激活。cAMP 激活的 PKA 參與調(diào)控 ERK1/2 的活性。ERK1/2 通路的觸發(fā)可能導(dǎo)致 Ca 2+分布不均勻,引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體功能障礙,導(dǎo)致細(xì)胞死亡。此外,cAMP 刺激 AKT 進(jìn)一步導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄因子 cFos 的表達(dá)。

II. Description
     CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293 報(bào)告基因藥靶模型很好的模擬了體內(nèi) CTR&RAMP1 的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程,原理見下圖所示。

CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293

Figure 1. CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293 細(xì)胞模型原理圖

III. Introduction
Host Cell:

HEK293

Stability:20 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium:90% FBS+10% DMSO
Culture Medium:DMEM + 10%FBS + 100 μg/ml Hygromycin B + 2 μg/ml Puromycin + 10 μg/ml Blasticidin
Mycoplasma Status:Negative
Storage:Liquid nitrogen immediately upon delivery
Application(s):

Functional assay for CTR/RAMP1

Transducer:Gs

IV. Description of Host Cell Line
Organism:Human
Tissue:kidney
Morphology: Epithelial
Growth Properties: Adherent

V. Representative Data

CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293


Figure 2. WB of  CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293.

CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293

Figure 3. Recombinant CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293 stably expressing CTR&RAMP1.

CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293


Figure 4. Detect Luciferase assay by Ultra Luciferase Detection Kit CBPH0001(we strongly suggest to purchase from Cobioer). Dose Response of CTR/RAMP1 Agonists in CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293 (C29).

CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293

Figure 5. HTRF cAMP Assay with CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293 (C29).



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